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糖类
仪器描述:主要检测植物中的总糖、可溶性总糖、还原糖、多糖等
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· 内容简介

植物糖类测试主要用于分析植物组织中的可溶性糖、淀粉、总糖等含量,这些指标对研究植物生理代谢逆性、果实品质等具有重要意义。以下是常见的测试方法及介绍:


1. 测试目标

  • 可溶性糖:包括葡萄糖、果糖、蔗糖等,反映植物的能量状态和甜度。

  • 淀粉:植物主要的储能形式,需水解为还原糖后测定。

  • 总糖:可溶性糖与淀粉的总和。

  • 还原糖:含有游离醛基或酮基的糖(如葡萄糖、果糖)。


2. 测试方法

(1) 蒽酮-硫酸法

  • 原理:糖类与蒽酮在浓硫酸作用下生成绿色化合物,在620 nm处测吸光度。

  • 特点

    • 适用于总糖(可溶性糖 + 淀粉)测定。

    • 灵敏度高,但需严格控制反应条件(如温度、时间)。

(2) 3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)

  • 原理:还原糖在碱性条件下将DNS还原为棕红色化合物,在540 nm处测吸光度。

  • 特点

    • 专一性检测还原糖(如葡萄糖、果糖)。

    • 操作简单,常用于酶解实验(如淀粉水解速率测定)。

(3) 苯酚-硫酸法

  • 原理:糖类与苯酚在浓硫酸中生成橙黄色化合物,在490 nm处测吸光度。

  • 特点

    • 适用于总糖测定,对多种糖类(包括多糖)响应灵敏。

    • 无需水解步骤,但干扰物质较多。

(4) 高效液相色谱(HPLC)

  • 原理:通过色谱柱分离不同糖类(如蔗糖、葡萄糖、果糖),用示差折光检测器或蒸发光散射检测器定量。

  • 特点

    • 可精准区分单糖、双糖及低聚糖。

    • 需要专业设备,成本较高。

(5) 酶解法

  • 原理:使用特定酶(如淀粉酶、蔗糖酶)水解多糖或双糖,再测定产物(如葡萄糖)。

  • 特点

    • 特异性强,常用于淀粉或蔗糖的单独测定。

    • 步骤繁琐,但结果准确。


3. 样品前处理

  • 可溶性糖提取:用80%乙醇或热水浸提,去除蛋白质和色素。

  • 淀粉水解:将残留物用酸或酶水解为葡萄糖后测定。


4. 应用场景

  • 生理研究:如光合产物分配、逆境(干旱、盐胁迫)下糖代谢变化。

  • 农业:评估作物品质(如水果甜度)、育种筛选。

  • 食品工业:植物原料含糖量分析。

 

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